聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,通过对基因的选择性片段进行体外高效扩增,从而实现目的基因的检测。
PCR-荧光探针法的主要原理是:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;随着PCR扩增,Taq酶的5'端-3'端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。